蛋白芯片是將各種蛋白質(zhì)有序地固定于載玻片等各種介質(zhì)載體上成為檢測的芯片上。隨著生命科學(xué)研究的不斷深入,作為蛋白質(zhì)組學(xué)重要研究工具、以高通量著稱的蛋白質(zhì)芯片發(fā)揮了越來越重要的作用。以上是蛋白芯片發(fā)展現(xiàn)狀分析。
蛋白芯片發(fā)展現(xiàn)狀
蛋白芯片是一種高通量監(jiān)測系統(tǒng),通雵過靶分雵子和捕捉分雵子相互作用來監(jiān)測彈白分雵子之間的相互作用。捕獲分雵子一般都預(yù)固定在芯片表面,由于抗體的高度特異性和與抗原強(qiáng)結(jié)合特性所以被廣泛的用做捕獲分雵子。對于研究蛋白芯片的研究在芯片表面有效固定抗體是非常關(guān)鍵的,特別是在固定抗體一致性方面非常關(guān)鍵對于增強(qiáng)蛋白芯片的靈敏度。G彈白是一種抗體結(jié)合彈白,他特意結(jié)合抗體FC片段,因此已被廣泛的用于固定不同類型的抗體。
在多年的蛋白芯片技術(shù)的研究過程中,研究者為了尋找合適的物質(zhì)作為蛋白的載體進(jìn)行了不懈的探索。例如學(xué)者Velev利用含有陽離子表面活性劑(HTAB)脂質(zhì)體作為載體,通過戊二醛作用使其與一種鐵蛋白包裹外殼的成分結(jié)合組裝制備成為一種納米水平的裝配體,這種裝配體可以在適當(dāng)?shù)膒H條件下,使鐵蛋白分子進(jìn)入并固定于包裹外殼內(nèi)面,形成蛋白質(zhì)的載體。
Adachi等利用某些固體表面或薄膜覆蓋上含有電解質(zhì)的薄膜作為載體,可以將膠體蛋白質(zhì)顆粒成分轉(zhuǎn)移至薄膜上形成蛋白芯片。Uetz等在分析啤酒酵母基因組序列全長度閱讀框架編碼各種蛋白質(zhì)的相互作用的過程,使用不同孔數(shù)的平板作為載體,建立了約含有6000個酵母轉(zhuǎn)化株組成的平板蛋白芯片系統(tǒng),平板上的每一個小孔中含有一個酵母轉(zhuǎn)化株,可以根據(jù)其活性功能區(qū)開放閱讀框架的編碼表達(dá)生成一種蛋白質(zhì),利用這個系統(tǒng)可以用于蛋白質(zhì)功能的檢測和分析。Arenkov等利用聚丙烯酰胺凝膠板作為支持物,將蛋白樣品置于凝膠上,然后經(jīng)過電泳分離,使其成為蛋白的陣列用于進(jìn)一步的研究。哈佛大學(xué)蛋白芯片研究中心Gavin等利用制備DNA芯片的高精密度機(jī)械手的針狀點樣槍頭在只有顯微鏡載玻片一半大小的玻片上,制備了第一張含有樣品點數(shù)為10800的蛋白芯片。
根據(jù)上海市醫(yī)學(xué)會組織專家評審會的一致推薦,上海市衛(wèi)生局根據(jù)衛(wèi)生部發(fā)布的《醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理辦法》將C-12 蛋白芯片檢測歸類為“第一類醫(yī)療技術(shù)”。第一類醫(yī)療技術(shù)是指“安全性、有效性確切,醫(yī)療機(jī)構(gòu)通過常規(guī)管理在臨床應(yīng)用中能確保其安全性、有效性的技術(shù)”。此次歸類將C-12 蛋白芯片檢測由傳統(tǒng)的健康篩查拓展至針對腫瘤病人的主流臨床應(yīng)用。
蛋白質(zhì)芯片有很多的優(yōu)勢,最突出的一點就是高通量,在一個反應(yīng)中可以檢測成千上百的指標(biāo),而且每個指標(biāo)之間基本上沒有相互干擾,這是其它檢測技術(shù)很難做到的。第二,微型化,所以樣本消耗量很少,對于比較珍貴的臨床樣本就是非常大的一個優(yōu)勢;第三,靈敏度很高。蛋白質(zhì)芯片上固定的蛋白,雖然量少,但是局部濃度很高,檢測樣本時有一個濃縮的效應(yīng),并且通過級聯(lián)放大和熒光檢測,可以現(xiàn)實高靈敏度檢測。第四,可以實現(xiàn)定量。在檢測時可設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線,這樣的可以做定量檢測,當(dāng)然,這個需要標(biāo)準(zhǔn)品可獲得的前提下。
綜上所述,蛋白芯片是以蛋白質(zhì)代替DNA作為檢測對象,與在mRNA水平上的檢測基因表達(dá)的基因芯片不同,它直接在蛋白水平上檢測表達(dá)模式,在基因表達(dá)研究中基因芯片有著更加直接的應(yīng)用前景。從商業(yè)化角度,國外,尤其是美國已經(jīng)形成了產(chǎn)業(yè),比我們要走得靠前。我們主要立足國內(nèi)的科研市場,匯總國內(nèi)外比較好的蛋白質(zhì)芯片產(chǎn)品,萬里長征邁出了第一步,相信將來會迎來一個爆發(fā)期。以上是蛋白芯片發(fā)展現(xiàn)狀分析。
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