在全球農(nóng)業(yè)科技快速發(fā)展的大環(huán)境下,轉(zhuǎn)基因技術(shù)在糧油作物領(lǐng)域的應(yīng)用愈發(fā)廣泛,成為提升農(nóng)作物產(chǎn)量、增強(qiáng)抗病蟲(chóng)害能力和適應(yīng)環(huán)境變化的重要手段。然而,隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的普及,對(duì)糧油中轉(zhuǎn)基因成分的準(zhǔn)確檢測(cè)以及有效監(jiān)管變得至關(guān)重要。2025年,一系列轉(zhuǎn)基因行業(yè)政策相繼出臺(tái),進(jìn)一步強(qiáng)化了對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的監(jiān)管力度,這也使得糧油中轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)工作面臨新的機(jī)遇與挑戰(zhàn)。
目前,糧油中轉(zhuǎn)基因成分的檢測(cè)方法主要分為常規(guī)檢測(cè)方法和快速檢測(cè)方法。常規(guī)檢測(cè)方法包括聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)、實(shí)時(shí)熒光定量 PCR、酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)技術(shù)、蛋白質(zhì)免疫印跡(Western Blot)技術(shù)和生物芯片技術(shù)。PCR 技術(shù)通過(guò) DNA 體外擴(kuò)增,利用引物識(shí)別目標(biāo)轉(zhuǎn)基因序列,實(shí)現(xiàn)目標(biāo) DNA 片段的指數(shù)級(jí)復(fù)制,具有高靈敏度和特異性,適用于轉(zhuǎn)基因成分鑒定和定量分析,但需要精確的引物設(shè)計(jì),對(duì)操作條件要求較高;實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 借助熒光探針與目標(biāo) DNA 序列特異性結(jié)合,實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)變化進(jìn)行定量分析,能精準(zhǔn)定量,靈敏度和特異性高,適合復(fù)雜基質(zhì)檢測(cè),不過(guò)需要特定的熒光探針,成本相對(duì)較高;ELISA 技術(shù)基于抗原與抗體特異性識(shí)別,酶標(biāo)記抗體與目標(biāo)蛋白結(jié)合引發(fā)底物顯色反應(yīng),操作簡(jiǎn)便、成本較低,適用于大量樣品檢測(cè),但可能存在交叉反應(yīng),對(duì)抗體特異性要求高;Western Blot 技術(shù)先通過(guò) SDS-PAGE 電泳分離蛋白質(zhì),再用特異性抗體進(jìn)行免疫結(jié)合,最后通過(guò)化學(xué)發(fā)光或染色顯影檢測(cè)目標(biāo)蛋白質(zhì),特異性高,可同時(shí)檢測(cè)多種蛋白,適用于復(fù)雜樣品,但操作復(fù)雜、耗時(shí)長(zhǎng),需要特定抗體;生物芯片技術(shù)將多種特異性抗體固定在芯片表面,通過(guò)抗原抗體特異性結(jié)合,利用熒光或化學(xué)發(fā)光技術(shù)檢測(cè),能高效識(shí)別和定量分析,可同時(shí)檢測(cè)多種目標(biāo),自動(dòng)化程度高,但成本高,對(duì)樣品制備要求也高。
《2025-2030年中國(guó)轉(zhuǎn)基因行業(yè)市場(chǎng)深度研究與戰(zhàn)略咨詢(xún)分析報(bào)告》針對(duì)轉(zhuǎn)基因大豆油和玉米油等糧油產(chǎn)品,快速試紙條技術(shù)憑借特異性抗體與轉(zhuǎn)基因特定蛋白或 DNA 片段的結(jié)合,能在 5 - 10 分鐘內(nèi)給出直觀檢測(cè)結(jié)果。時(shí)間分辨熒光試紙條技術(shù)進(jìn)一步提升了檢測(cè)的靈敏度和特異性,尤其適用于轉(zhuǎn)基因外源蛋白或 DNA 片段的高效檢測(cè),像在轉(zhuǎn)基因大豆油中 CaMV 35S 啟動(dòng)子或玉米油中 PAT 基因的快速篩查上表現(xiàn)出色,操作簡(jiǎn)便,檢測(cè)過(guò)程僅需 15 分鐘,結(jié)果還可通過(guò)便攜式熒光讀取儀進(jìn)行定量分析。
油脂中 DNA 提取難度大是檢測(cè)面臨的一大難題。食用油的制取原料、處理方式、加工工藝以及儲(chǔ)存條件的多樣性,會(huì)顯著影響油脂中 DNA 的殘留量和完整性。經(jīng)過(guò)深度加工,如精煉(通常在 100 - 150℃、0.1 - 0.5MPa 條件下)和脫臭(180 - 250℃、30 - 60min)后,油脂中的 DNA 含量急劇下降至納克級(jí),分子結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞,提取難度大增。而且油脂中復(fù)雜的基質(zhì)成分,如脂肪、蛋白質(zhì)、多糖等,會(huì)與 DNA 形成共沉淀,干擾提取過(guò)程,降低 DNA 的純度和得率,影響后續(xù)檢測(cè)準(zhǔn)確性。
我國(guó)在轉(zhuǎn)基因糧油產(chǎn)品檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)方面存在缺失問(wèn)題。在我國(guó) 2300 余種食品添加劑中,約 920 種(占 40%)有明確檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn),而剩余 1380 余種(占 60%)檢測(cè)方法尚未統(tǒng)一規(guī)范。轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)涉及復(fù)雜科學(xué)技術(shù)原理,且開(kāi)發(fā)周期長(zhǎng),從初步實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)到形成國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),通常需要數(shù)年時(shí)間,這導(dǎo)致市場(chǎng)上部分新的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品缺乏對(duì)應(yīng)的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。
轉(zhuǎn)基因成分追溯也困難重重。一旦糧油產(chǎn)品抽檢發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因成分超標(biāo),執(zhí)法人員需明確產(chǎn)品類(lèi)別、了解生產(chǎn)工藝、調(diào)查不合格原因等。然而,糧油供應(yīng)鏈復(fù)雜,從原料到成品多個(gè)環(huán)節(jié)都可能引入轉(zhuǎn)基因成分,執(zhí)法人員即便采用多種調(diào)查手段,也面臨獲取準(zhǔn)確信息的難題。
提高 DNA 提取效率可從多方面入手。先確保樣品均勻混合,充分研磨并使用機(jī)械混勻器;預(yù)處理時(shí)用含 EDTA 和 RNase 抑制劑的保護(hù)液,將樣品儲(chǔ)存于 - 20℃冰箱;根據(jù)樣品特點(diǎn)選擇合適提取方法,如大豆油用磁珠法;優(yōu)化提取條件,適當(dāng)增加溶解時(shí)間,在 65℃水浴孵育 30min,反復(fù)攪拌離心;必要時(shí)加入 10μg 載體 RNA 提高提取效率;提取后檢測(cè) DNA 濃度、純度和完整性,并在 PCR 反應(yīng)中驗(yàn)證可用性。
加快轉(zhuǎn)基因糧油檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)制定與更新,可借鑒現(xiàn)有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),加快新轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)立項(xiàng)與制定,縮短周期,建立快速響應(yīng)機(jī)制。加強(qiáng)跨部門(mén)合作,共享資源協(xié)同推進(jìn),參考行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)開(kāi)發(fā)驗(yàn)證檢測(cè)方法。加大對(duì)實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)施和人才投入,加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)和能力驗(yàn)證。積極參與國(guó)際交流合作,引進(jìn)轉(zhuǎn)化國(guó)際先進(jìn)標(biāo)準(zhǔn),推進(jìn)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)國(guó)際化。
提高監(jiān)管效能需要相關(guān)部門(mén)建立聯(lián)合工作組,定期召開(kāi)協(xié)調(diào)會(huì)議,共享資源信息,嚴(yán)格監(jiān)管各環(huán)節(jié)。對(duì)供應(yīng)商實(shí)地考察,審查供貨記錄和檢測(cè)報(bào)告,關(guān)注儲(chǔ)存運(yùn)輸條件;對(duì)生產(chǎn)企業(yè)檢查原料采購(gòu)憑證、檢測(cè)報(bào)告和生產(chǎn)工藝流程,關(guān)注轉(zhuǎn)基因原料分離標(biāo)識(shí)、混合食用油調(diào)配比例和標(biāo)識(shí),調(diào)取審閱生產(chǎn)記錄和質(zhì)控文件,采用區(qū)塊鏈技術(shù)實(shí)現(xiàn)生產(chǎn)數(shù)據(jù)實(shí)時(shí)記錄和監(jiān)控,確??勺匪菪浴?
在2025年轉(zhuǎn)基因行業(yè)政策趨嚴(yán)的背景下,糧油中轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)雖然借助現(xiàn)有技術(shù)能識(shí)別轉(zhuǎn)基因成分,但依然面臨油脂中DNA提取難、標(biāo)準(zhǔn)缺失、轉(zhuǎn)基因成分追溯認(rèn)定難等挑戰(zhàn)。未來(lái),必須重視技術(shù)創(chuàng)新與標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范,不斷探索新技術(shù),完善檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)體系,加強(qiáng)監(jiān)管力度,引入高通量篩選技術(shù)和智能化檢測(cè)設(shè)備,以保障糧油產(chǎn)品的質(zhì)量安全,推動(dòng)轉(zhuǎn)基因行業(yè)健康、有序發(fā)展。
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